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膠原酶I的化學(xué)本質(zhì)及使用
膠原酶的化學(xué)名為膠原蛋白水解酶(Collagenase)，它能在生理PH和溫度條件下特異性地水解天然膠原蛋白的三維螺旋結(jié)構(gòu)，而不損傷其它蛋白質(zhì)和組織。膠原酶I的化學(xué)本質(zhì)是一種蛋白酶，它能夠特異性的結(jié)合Pro-X-Glyc-Pro序列中，中性氨基酸(X)和甘氨酸之間的肽鍵。該序列高頻率的存在于膠原中。膠原酶是*的一種可以降解廣泛存在于結(jié)締組織中的具有三股螺旋的天然膠原纖維的蛋白酶。但同時(shí)，這對(duì)溫度、PH和導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性的各種因素均非常敏感，極易受到外界條件的影響而改變其本身的構(gòu)...
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2015-03-09
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CCK8試劑盒日本同仁常見(jiàn)問(wèn)題解答(二)
上篇文章，我們已經(jīng)介紹了一部分CCK8試劑盒日本同仁的常見(jiàn)問(wèn)題，本文將繼續(xù)為大家講解。1、實(shí)驗(yàn)之前，是否需要先檢測(cè)一下培養(yǎng)基和CCK-8是否會(huì)反應(yīng)?建議使用一個(gè)孔作一下檢測(cè)，因?yàn)橛信囵B(yǎng)基中可能含有氧化還原反應(yīng)的物質(zhì)，在正式實(shí)驗(yàn)之前有必要先確認(rèn)培養(yǎng)基和CCK-8是否反應(yīng)。一般正常在的OD值應(yīng)該在0.4以下。2、如果加入的藥物中含有金屬，是否會(huì)有影響?金屬對(duì)CCK-8顯色有影響。當(dāng)終濃度為1Mm的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會(huì)抑制5%、15%、90%的顯色反應(yīng)，使靈敏度降級(jí)。如果終濃...
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2015-03-02
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CCK8試劑盒日本同仁常見(jiàn)問(wèn)題解答(一)
CCK8試劑盒日本同仁是常用的試劑盒之一，很多客戶在使用時(shí)都會(huì)有一些疑問(wèn)，北京沃比森整理總結(jié)一些常見(jiàn)的問(wèn)題，希望給大家一些參考和借鑒。1、一個(gè)孔中應(yīng)接種多少個(gè)細(xì)胞?當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)96孔板時(shí)，貼壁細(xì)胞的zui小接種量至少為1,000個(gè)/孔(100μl培養(yǎng)基)。檢測(cè)白細(xì)胞時(shí)的靈敏度相對(duì)較低，因此推薦接種量不低于2,500個(gè)/孔(100μl培養(yǎng)基)。如果要使用24孔板或6孔板實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)先計(jì)算每孔相應(yīng)的接種量，并按照每孔培養(yǎng)基總體積的10%加入CCK-8溶液。2、CCK8試劑盒日本同仁能否...
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2015-01-27
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GelRed核酸染料的產(chǎn)品特性
GelRed核酸染料產(chǎn)品特性：1.高靈敏度GelRed和GelGreen是目前市場(chǎng)中zui靈敏的凝膠核酸染料2.GelRed核酸染料更安全艾姆斯氏試驗(yàn)結(jié)果表明，該染料的誘變性遠(yuǎn)小于溴化乙錠(EB)3.穩(wěn)定性*可以使用微波爐加熱，可以在室溫下保存4.信噪比高樣品熒光信號(hào)強(qiáng)，背景信號(hào)低。5.GelRed核酸染料有廣泛的適應(yīng)性適用于預(yù)制凝膠和凝膠電泳后染色6.染色過(guò)程簡(jiǎn)單與EB一樣，在預(yù)制膠和電泳過(guò)程中不必?fù)?dān)心染料降解;而電泳后染色過(guò)程也只需30分鐘且無(wú)需脫色或沖洗，即可直接用紫外...
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2015-01-21
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脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染DNA的操作過(guò)程
脂質(zhì)體2000適用于把DNA轉(zhuǎn)染入懸浮或貼壁培養(yǎng)細(xì)胞中，是目前條件下zui方便的轉(zhuǎn)染方法之一。轉(zhuǎn)染率高，優(yōu)于磷酸鈣法，比它高5~100倍，能把DNA和RNA轉(zhuǎn)染到各種細(xì)胞。用脂質(zhì)體2000進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí)，首先需優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件，應(yīng)找出該批LR對(duì)轉(zhuǎn)染某一特定細(xì)胞適合的用量、作用時(shí)間等，對(duì)每批LR都要做：先要固定一個(gè)DNA的量和DNA/LR混合物與細(xì)胞相互作用的時(shí)間，DNA可從1~5μg和孵育時(shí)間6小時(shí)開(kāi)始，按這兩個(gè)參數(shù)繪出相應(yīng)LR需用量的曲線，再選用LR和DNA兩者*的劑量，確定出轉(zhuǎn)染...
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2015-01-13
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HyClone胎牛血清培養(yǎng)平滑肌細(xì)胞的兩種方法
HyClone胎牛血清培養(yǎng)血管平滑肌細(xì)胞常用的方法有貼塊法(explant)和酶解離法(enzymedisperse)。下面一起來(lái)看下這兩種方法。1、貼塊法方法：動(dòng)物經(jīng)頸動(dòng)脈放血后，在無(wú)菌操作下迅速取出胸腹主動(dòng)脈段，置于含Hank's液的平皿中漂洗3次，將凝塊洗干凈后剝除外膜的纖維脂肪層，然后縱行切開(kāi)血管，刮除內(nèi)膜即內(nèi)皮細(xì)胞迅速撕下中膜內(nèi)、中層，切成約1mm寬的小條，浸泡在含血清的Hank's液中，并將撕下小組織塊種植于培養(yǎng)瓶壁。置于37℃恒溫箱，2h左右，取出培養(yǎng)瓶加入20...
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2015-01-06
010-53516884
當(dāng)前位置：